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本发明公开了借助比率荧光探针定量检测血清中可代谢产生H<Sub>2</Sub>O<Sub>2</Sub>的生物分子的方法,首先,制备铜氮共掺杂碳点Cu‑CDs;然后,将可代谢产生H<Sub>2</Sub>O<Sub>2</Sub>的生物分子与对应的氧化酶反应生成H<Sub>2</Sub>O<Sub>2</Sub>,用辣根过氧化酶催化H<Sub>2</Sub>O<Sub>2</Sub>,与底物邻苯二胺反应生成有黄色荧光的氧化产物DAP;接着,加入Cu‑CDs,DAP与Cu‑CDs形成比率荧光,两者荧光强度的比值I<Sub>572</Sub>/I<Sub>460</Sub>与待测物浓度呈线性关系,根据两者荧光强度的比值,定量测定血清中生物分子,灵敏度高、检测简便,具有免疫反应的高选择性、高亲和力。