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本发明公开了一种T4多聚核苷酸激酶的定量检测方法,包括步骤:首先设计巯基化单链DNA探针a、探针b和5’端修饰氨基的探针c,探针a通过金‑巯键固定于金电极表面;探针a 5’端的羟基可被T4多聚核苷酸激酶催化磷酸化,DNA探针a接着与探针b、探针c杂交,探针c的3’端与探针a的5’端的磷酸基团在T4 DNA连接酶作用下发生连接反应;再进行加热变性处理,探针c仍然保留在电极表面,探针c末端的氨基可进一步捕获银纳米颗粒,最后通过检测银纳米颗粒的溶出伏安信号得到T4多聚核苷酸激酶的定量检测结果。本发明具有灵敏度高,选择性好,快速以及成本低的特点,检测限为0.01U/mL。
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